7.15

From CSBLwiki

colony PCR

1. 20ul DW에 colony를 적당량 섞고

2. 95'C에서 5분

3. centrifuge maxi 3분

4. soup을 templete로 4ul

5. PCR

Slica gel에 DNA가 binding 하는 이유

참고) http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_separation_by_silica_adsorption

Binding to silica surfaces in the presence of certain salts and under certain pH conditions.

negative를 띠는 slica gel과 DNA가 염을 사이에 두고 결합을 하게 되어 membrane에 binding하게 된다 그 후 증류수로 washing 하면 염이 없어서 다시 빠져나간다.

restriction enzyme

Sma1(20U/ul) 1

플라스미드 44

버퍼 5

up to 50