7.24

From CSBLwiki

Electroporation comp cell 만들기

1. 2x LB에 접종해서 OD 0.6-0.8정도 까지 키우고 얼음에 20분 방치

2. sorvall tube로 옮겨 담고, 3600rpm, 4'C 5min 원심분리

3. cell down된 pellet을 glycerol을 이용하여 concentration(잔여배지를 없에기 위한 농축과정)

200ml ; glycerol 20 resuspend - 5min 원심분리 - glycerol 10 - 5min resuspend - glycerol 5 - 5min - glycerol 2

100ml ; 10-5-3-1

4. tube에 50-100씩 덜어서 액체질소 보관

gel extraction kit

원리는 그냥 DNA 추출이랑 비슷

전기영동 후 원하는 부분을 잘라서 젤을 녹인 후 실리카겔에 통과시켜 dna만 남게한 후 washing, elution 해서 추출

1. 원하는 gel 위치를 잘라서

2. 1g에 1ml 만큼 QX1(agar 녹이는거)를 넣어줌

3. 실리카겔에 옮기고

4. 원심분리

5. QX1 500

6. PE(washing) 500 넣고 원심분리 * 2

7. elution