8.14
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pB4 가 transformation이 안됬다
Transformation
pB4가 안되서 다시
BL21(DE3) - pB4
DH5a-pB4, pRBAOK
PCR cycle
pcr cycle 돌릴 때 앞,뒤에 단계가 하나씩 더있다
효소활성화(95)-분리-primer 붙기-연장-연장마무리(75) 5분
PCR
primer 도착해서
N,DR 용, CA 용, R용 primer를 섞어서 만들고 pcr
TEMP(pATLIC 4개) 0.5
10x buffer 5
HQ(primer가 스스로 접히는거 방지-linear하게끔) 5
dNTP 2.5 2.5 2.5 1.5(R은 사이즈가 작아서)
PRIMER 1.5
DW 35 35 35 34
a-Taq 0.5