Electroporation

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전기충격으로 membrane을 흐물흐물하게 만든 후 DNA를 transformation하는 방법으로, cell이 죽기 쉬우나 efficiency가 높다.

과전류가 흘러서 cell이 죽지 않도록 buffer에서의 이온제거가 중요해서 버퍼에 담겨있는 DNA를 10% 미만으로 적게 넣어야한다.

전기천공법은 cell에게 부담을 주는 방법이기 때문에 차가운 환경에서 진행된다.

그 외에 큐벳에 물기가 남아있으면 안 되고, 기포가 생기면 안 된다.

1. Ice colded comp cell(KOX)과 큐벳 준비

2. comp cell 50 에 DNA 1

3. Ice incubate 5min

4. 큐벳에 옮기고 pulse (셀이 큐벳 밑으로 가도록 툭툭 쳐준다.)

5. pulse 후 pre-warmed LB 400를 넣어준다.

6. 37'C incubate 60min

7. 항생제배지(kanamycin)에 도말 overnight