2.13

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단백질발현실험

5. cell harvest : large scale ; 500ml bottle 두개에 옮겨 담아서 원심분리 후 냉동보관

                 small scale ; 500 마이크로L 만 따로 떠서 원심분리

6. cell Lysis : small scale ; lysis 용액인 bugbuster 100 마이크로L 에 현탁 후 30분 상온보관, 원심분리 10분(!)

7. protein gel loading : SDS-PAGE ;

-soluble과 insoluble+buffer 100마이크로L 준비

-protein 20 마이크로L + 5*sample buffer 5 마이크로L

-HEAT ; denature 5min at 95`c

-1초 spin down

-marker랑 같이 로딩 ;

-instant blue로 염색

-로딩결과 원하는 단백질로 추정되는 soluble protein이 보임