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	LBK 100ml : LB 2.5g, agar 1.5g, ×1000 kan 100마이크로l		LBK 100ml : LB 2.5g, agar 1.5g, ×1000 kan 100마이크로l
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		+	항생제는 배지가 60°C 이하일때 넣는다.
		+	배지는 만들고 잠시 1,2시간 동안 건조기에 보관 가능하다. 하지만 contamination에 유의
	=competent cell 만들기=		=competent cell 만들기=

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Revision as of 05:34, 23 January 2013

항생제배지만들기

LBA 100ml : LB 2.5g, agar 1.5g, ×1000 amp 100마이크로l

LBK 100ml : LB 2.5g, agar 1.5g, ×1000 kan 100마이크로l

항생제는 배지가 60°C 이하일때 넣는다. 배지는 만들고 잠시 1,2시간 동안 건조기에 보관 가능하다. 하지만 contamination에 유의

competent cell 만들기

3. 5ml LB broth에서 하루배양한 것의 2ml를 추출해서 만들어놓은 2×LB medium 2000ml에 넣어 OD600이 0.6~0.8 될 때까지 37°C 200rpm에서 배양한다.

cf) OD600(optical density)은 600nm에서의 흡광도로, 탁한정도를 나타내며 이는 미생물의 농도와 관련있다. 0.6~0.8이 되기엔 대략 3시간 정도가 필요하다.

4.OD600이 0.8에 도달하면 ice에 20분간 냉각한다.(우리실험실 기기로는 0.3에 도달해도 된다고 간주함)