PCR

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alpha-Taq pol

PCR Clean up





pcr cycle 돌릴 때 앞,뒤에 단계가 하나씩 더있다

효소활성화(95)-분리-primer 붙기-연장-연장마무리(75) 5분


HQ는 primer가 자기스스로 붙어서 헤어핀을 만들지 않도록 linear하게 만들어준다.




reaction buffer는 무조건 5

dNTP mix는 1kb당 1 혹은 +1

primer 2

Templete - copy수가 많은 plasmid DNA의 경우 1

Templete - genomic DNA의 경우 3

alpha-Taq 0.5

DW up to 50


extension 0.5-1min/kb

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