PCR
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pcr cycle 돌릴 때 앞,뒤에 단계가 하나씩 더있다
효소활성화(95)-분리-primer 붙기-연장-연장마무리(75) 5분
HQ는 primer가 자기스스로 붙어서 헤어핀을 만들지 않도록 linear하게 만들어준다.
reaction buffer는 무조건 5
dNTP mix는 1kb당 1 혹은 +1
primer 2
Templete - copy수가 많은 plasmid DNA의 경우 1
Templete - genomic DNA의 경우 3
alpha-Taq 0.5
DW up to 50
extension 0.5-1min/kb